Skip to main content
Logo PKLogo PK

Stosowane metody badawcze


Metody in vivo:

  • Opracowanie metod kolekcji materiału biologicznego od zwierząt wolno żyjących (nasienie, krew obwodowa, kał, fragmenty tkanek, biopsje)

Metody in vitro:

Izolacja enzymatyczna i hodowle komórkowe:

  • komórki nabłonka i tkanki łącznej błony śluzowej macicy.
  • komórki steroidogenne ciałka żółtego.
  • komórki warstwy ziarnistej pęcherzyka jajnikowego.
  • komórki śródbłonka naczyń krwionośnych ciałka żółtego i błony śluzowej macicy.

Inkubacje tkankowe:

  • skrawki błony śluzowej macicy.
  • skrawki ciałka żółtego.

Metody analityczne

3.1. Metody biologii molekularnej:

  • ekspresja czynników pro- i antyapaptotycznych (TNFα, IFNγ, IL-1α, Il-6, FasL, BCL2, BAX, Caspase3, Caspase8) i ich receptorów.
  • ekspresja enzymów szlaku steroidogenezy (3β-HSD, StAR, CYP450)
  • ekspresja enzymów szlaku metabolizmu kwasu arachidonowego:
    • szlak powstawania leukotrienów (5-LOX) i ich receptorów.
    • szlak powstawania prostaglandyn (PTGS-2, PGES, PGFS, 9KPGR, AKR1B5).
  • ekspresja oksytocyny i  jej receptora.

3.2. Immunoizotopowe oznaczanie (RIA) stężeń:

  • hormonów białkowych (LH, PRL) i receptorów  LH/hCG oraz cytokin (IL-1β, IL-6, TNF-α)
  • hormonów steroidowych (P4, A4, T, E1, E2, kortyzol), prostaglandyn oraz metabolitu PGF2α – PGFM.

3.3. Immunoenzymatyczne oznaczanie stężeń (ELISA):

  • hormonów białkowych (LH) i peptydowych (oksytocyna, endotelina).
  • hormonów steroidowych (P4, T4, E2).
  • prostaglandyn (PGE2, PGF2α) oraz metabolitu PGF2α – PGFM

3.4. Immunocytochemiczna lokalizacja w narządach rozrodczych samicy:

  • enzymów szlaku przemian kwasu arachidonowego (PTGS-2, PGES, PGFS, AKR1B5, 5-LO).
  • cytokin i ich receptorów (np. TNF-α, IL-1α, IL-1β i innych).
  • enzymów szlaku przemian cholesterolu (P450scc, 3β-HSD, aromatazy).

3.5. Wysokosprawna chromatografia cieczowa (HPLC):

  • hormonów steroidowych w materiale biologicznym,
  • enzymów szlaku metabolizmu kwasu arachidonowego.