Przygotowanie materiału do badań:
- Izolacja komórek: ciałka żółtego, myometrium, endometrium, nabłonka jajowodu
- Hodowle komórek i skrawków: inkubator (Memmert, Niemcy)
Metody analityczne i pomiarowe:
- Ocena przeżywalności komórek (test cytotoksyczności): czytnik ELISA (Multiscan EX, Labsystems, Finlandia)
- Enzymoimmunologiczne oznaczanie hormonów steroidowych, białkowych i prostaglandyn (czytnik ELISA, Multiscan EX,Labsystems)
- Klasyczna technika PCR i jej modyfikacje: RT-PCR, nested-PCR, touchdown PCR (system dokumentacji żeli MiniBIS Pro)
- Pomiar zmian ekspresji genów metodą RT PCR i Real-time PCR:
- izolacja RNA, (spektrofotometr BioPhotometr, Eppendorf, oraz spektrofotometr Nonodrop)
- odwrotna transkrypcja, PCR (termocykler MJ Mini BioRad)
- system detekcji dla Real-time PCR (APB Prism 7300 Applied Biosystems, USA)
- system do analizy obrazu MiniBIS Pro (DNR Bio Imaging System, Israel)
- 5’ i 3’ RACE PCR – szybka amplifikacja końców cDNA
- Pomiar ilości białka metodą Western Blot: Mini PROTEAN 3 System (system dokumentacji żeli MiniBIS Pro).
- Pomiar mobilizacji wewnątrzkomórkowych jonów Ca2+ z wykorzystaniem barwnika fluorescencyjnego Fura 2 (mikroskop Nikon Eclipse TS 100 z oprogramowaniem do analizy NIS-Elements Basic Research),
- Immunohistochemia (kriostat, analiza obrazu – mikroskop Imager Z1-Zeiss z oprogramowaniem Axio Vision 4.8).
- Pomiar aktywności motorycznej (kurczliwości) skrawków myometrium i jajowodu: tensometr (Hugo Sachs Elektronik, Niemcy – urządzenie na stanie ZLRF)
- Oznaczanie katecholamin metodą HPLC z detekcją elektrochemiczną (Hewlett-Packard, Series 1050)
